ชุดไพรเมอร์ (primer) และตัวตรวจจับสำเร็จรูป (DNA probe) วิธีการตรวจสารพันธุ กรรม และชุดตรวจสารพันธุกรรมสำหรับตรวจหาเชื้อลิสทีเรีย โมโนไซโตจิเนส (Listeria monocytogenes) ด้วยปฏิกิริยาการสังเคราะห์ดีเอ็นเอแบบห่วง หรือ แลมป์ (loop-mediated isothermal amplification หรือLAMP) ผนวกกับแผ่นตรวจวัดแบบ แถบสี (Dipstick) โดยใช้ยีนลิสเทอริโอไลซิน โอ หรือ Listeriolysin O (hly) ในการออกแบบชุดไพรเมอร์ (primer) และตัวตรวจจับสำเร็จรูป (DNA probe)

Abstract

การประดิษฐ์นี้เกี่ยวข้องกับชุดไพรเมอร์ (primer) และตัวตรวจจับสำเร็จรูป (DNA probe) สำหรับตรวจเชื้อลิสทีเรีย โมโนไซโตจิเนส (.Listeria monocytogenes) ด้วยปฏิกิริยาการเพิ่มปริมาณสาร พันธุกรรมด้วยอุณหภูมิระนาบเดียวจากการชักนำของไพรเมอร์ให้เกิดการสังเคราะห์ดีเอ็นเอแบบห่วง หรือ แลมป์ (loop mediated isothermal amplification หรอ LAMP) ผนวกกับแผ่นตรวจวัดแบบแถบสี (Dipstick) ซึ่งเริ่มจากการพัฒนาเทคนิคแลมป์ หรือ LAMP โดยการออกแบบไพรเมอร์และตัวตรวจจับ สำเร็จรูปสำหรับตรวจเชื้อลิสทีเรีย โมโนไซโตจิเนส (.Listeria monocytogenes) 4 เส้น จากลำดับเบสใน ส่วนของยีนลิสเทอริโอซิน โอ (Listeriolysin O) ที่จำเพาะต่อเชื้อลิสทีเรีย โมโนไซโตจิเนส (Listeria monocytogenes) ซึ่งไพรเมอร์ตัวหนึ่งจะติดฉลากด้วยสารไบโอทิน (biotin) ในระบบนีดีเอ็นเอเป้าหมาย จะถูกเพิ่มปริมาณภายใต้อุณหภูมิประมาณ 60 องศาเซลเซียส ร่วมกับการเดิมตัวตรวจจับ (probe) ที่ ออกแบบอย่างจำเพาะต่อผลผลิตจากแลมป์ หรือ LAMP เป็นเวลาประมาณ 1 ชั่วโมง 30 นาที ในกล่อง ให้ความร้อน (heating block) ต่อจากนั้นดูดสารละลายที่ได้นี้ใส่ลงไปในหลอดที่มีสารละลายบัฟเฟอร์ แล้วจุ่มแผ่น ตรวจวัดแบบแถบสี (Dipstick) ลงไปในสารละลาย รอเวลาประมาณ 5-10 นาที แล้วอ่าน ผลการตรวจ ------------ การประดิษฐ์นี้เกี่ยวข้องกับชุดไพรเมอร์ (primer) และตัวตรวจจับสำเร็จรูป (DNA probe) สำหรับตรวจเชื้อลิสทีเรีย โมโนไซโตจิเนส (Listeria monocytogenes) ด้วยปฎิกิริยาการเพิ่มปริมาณสาร พันธุกรรมด้วยอุณภูมิระนาบเดียวจากการชักนำของไพรเมอร์ให้เกิดการสังเคราะห์ดีเอ็นเอแบบห่วง หรือ แลมป์ (loop mediated isothermal amplification หรือ LAMP) ผนวกกับแผ่นตรวจวัดแบบแถบสี (Dipstick) ซึ่งเริ่มจากการพัฒนาเทคนิคแลมป์ หรือ LAMP โดยการออกแบบไพรเมอร์และตัวตรวจจับ สำเร็จรูปสำหรับตรวจเชื้อลิสทีเรีย โมโนไซโตจิเนส (Listeria monocytogenes) 4 เส้น จากลำดับเบสใน ส่วนของยีนลิสเทอริโอซิน โอ(Listeriolysin O) ที่จำเพาะต่อเชื้อลิสทีเรีย โมโนไซโตจิเนส (Listeria monocytogenes) ซึ่งไพรเมอร์ตัวหนึ่งจะติด)ฉลากด้วยสารไบโอทิน (biotin) ในระบบนี้ดีเอ็นเอเป้าหมาย จะถูกเพิ่มปริมาณภายใต้อุณหภูมิประมาณ 60 องศาเซลเซียส ร่วมกับการเติมตัวตรวจจับ (probe) ที่ ออกแบบอย่างจำเพาะต่อผลผลิตจากแลมป์ หรือ LAMP เป็นเวลาประมาณ 1 ชั่วโมง 30 นาทีในกล่อง ให้ความร้อน (heating block) ต่อจากนั้นดูดสารละลายที่ได้นี้ใส่ลงไปในหลอดที่มีสารละลายบัฟเฟอร์ แล้วจุ่มแผ่น ตรวจวัดแบบแถบสี (Dipstick) ลงไปในสารละลาย รอเวลาประมาณ 5-10 นาที แล้วอ่าน ผลการตรวจ